摘 要:本发明公开了一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，属于分析检测技术领域。本方法采用顶空气相色谱法，经升温程序，外标法定量测定工业大麻加工提取物中甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷6种有机溶剂的残留量。本方法操作简单，灵敏度和准确率高，各溶剂回收率在95～105％范围内；精密度好，该方法结果重复性RSD＜3％，适合工业大麻加工提取物中有机溶剂残留量的检测。
权利要求书
1.一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，其特征在于，采用顶空气相色谱检测方法，同时测定甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷6种有机溶剂的残留量。
2.根据权利要求1所述的一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的配制：称取0.1～0.5g样品置于顶空瓶中，精确至0.0001g，加入5mL溶剂，加盖密封，摇匀，得到样品溶液；
(2)空白溶液的制备：精密量取5mL溶剂，置于20mL顶空瓶中，密封，即得；
(3)对照品溶液的制备：分别精密量取甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷各1mL，置100mL量瓶中，加溶剂定容至刻度，摇匀，配制成10mg/mL的六种混合对照品储备液， 20℃密封避光保存。标准工作溶液：分别精密量取六种混合对照品贮备液0.125mL、0.25mL、0.5mL、1mL、2mL至50mL容量瓶中，用溶剂定容至刻度，摇匀，即得到浓度分别为25、50、100、200、400μg·mL 1的系列标准工作溶液，现用现配；
(4)设置分析条件；
(5)标准曲线的建立：将步骤(3)中制备的对照品溶液进样测定，根据峰面积与对照品溶液中溶质的质量浓度的对应关系建立标准曲线；
(6)空白溶液和供试品溶液的测定：将步骤(1)中制备的供试品和步骤(2)中制备的空白溶液分别进样测定，利用标准曲线，计算供试品溶液中溶剂残留含量。
3.根据权利要求2所述的一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)中所述溶剂包括N N二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、N 甲基吡咯烷酮中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，其特征在于，步骤(4)中所述分析条件为：
色谱柱：交联色谱柱，规格：30m×0.25mm×0.25μm；
顶空自动进样器条件：顶空平衡温度：60～110℃；顶空平衡时间：10～30min；进样环温度：100～120℃；进样时间：1min；传输线温度110～130℃；
进样口温度：200～250℃；
柱温：起始温度为30～50℃，维持时间5～10min，以10～20℃/min速率升至100～150℃，保持2～5分钟；
检测器：FID、ECD、NPD或FPD检测器；检测器温度：250℃；
进样模式：分流进样，分流比为5～20:1；
载气：高纯惰性气体，流速1～5mL/min；
氢气流量：40～60mL/min；空气流量：450mL/min；尾吹流量：30mL/min。
5.根据权利要求1所述的一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述工业大麻提取物是指含大麻二酚(CBD)、大麻色烯(CBC)、次大麻二酚(CBDV)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻萜酚(CBG)、大麻酚(CBN)中的一种或多种大麻素的植物提取物。
技术领域
本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法。
背景技术
工业大麻提取物是指含大麻二酚(CBD)、大麻色烯(CBC)、次大麻二酚(CBDV)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻萜酚(CBG)、大麻酚(CBN)中的一种或多种大麻素的植物加工提取物。随着全球工业大麻种植加工的合法化进程加速，工业大麻加工提取物的应用政策的逐步放开，工业大麻国际上合法化国家持续增加，截至目前，全球有超过50个国家宣布CBD合法。
有研究表明目前工业大麻提取物中的大麻二酚(CBD)对患有孤独症谱系障碍(ASD)的儿童和青少年具有明显的改善作用，且无副作用。全球规模最大的药用大麻与癌症研究近日发表，结果显示，药用大麻在舒缓癌症症状方面获得压倒性科学支持，不仅能有效舒缓与癌症相关的症状，包括疼痛、恶心及食欲不振，亦显示出可能具备抗癌作用；研究人员将CBD与多种抗癌药物(依托泊苷、顺铂、紫杉醇和他莫昔芬等)联合处理A549细胞。结果显示，在这些组合中，依托泊苷与CBD联合使用时，对细胞增殖的抑制作用最强。来自军事科学院军事医学研究院高月研究员团队围绕系列急性放射损伤的中药防治研究取得重要突破：首次发现火麻仁油及大麻二酚(CBD)，可通过Atf2 Wnt/BMP信号通路，促进造血干细胞干性恢复，提升辐照动物存活率。
工业大麻加工提取物在生产提取过程中会用到多种有机溶剂，很多有机溶剂对环境、人体都有一定的危害，当工业大麻加工提取物中所残留的有机溶剂高于安全值时，不仅会影响提取物的稳定性，还会影响人体和周围环境，因此各国药典、化妆品规范及食品安全标准等均要求控制生产过程中使用的有机溶剂的残留量。
本发明针对工业大麻提取物生产过程中所用到的有机溶剂：甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷，采用顶空气相色谱法，准确测定6种有机溶剂的残留量，确保产品品质符合相关规定。
发明内容
针对背景技术中存在的问题，本发明提出一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，以解决上述技术问题，本发明的技术方案是这样实现的。
一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，包括如下步骤：
(1)供试品溶液的配制：称取0.1～0.5g样品置于顶空瓶中，精确至0.0001g，加入5mL溶剂，加盖密封，摇匀，得到样品溶液；
(2)空白溶液的制备：精密量取5mL溶剂，置于20mL顶空瓶中，密封，即得；
(3)对照品溶液的制备：分别精密量取甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷各1mL，置100mL量瓶中，用溶剂定容至刻度，摇匀，配制成10mg/mL的六种混合对照品储备液， 20℃密封避光保存。标准工作溶液：分别精密量取六种混合对照品贮备液0.125mL、0.25mL、0.5mL、1mL、2mL至50mL容量瓶中，用溶剂定容至刻度，摇匀，即得到浓度分别为25、50、100、200、400μg·mL 1的系列标准工作溶液，现用现配。
(4)设置分析条件；
(5)标准曲线的建立：将步骤(3)中制备的对照品溶液进样测定，根据峰面积与对照品溶液中溶质的质量浓度的对应关系建立标准曲线；
(6)空白溶液和供试品溶液的测定：将步骤(1)中制备的供试品和步骤(2)中制备的空白溶液分别进样测定，利用标准曲线，计算供试品溶液中溶剂残留含量。
进一步地，步骤(4)中所述分析条件为：
色谱柱：交联色谱柱，规格：30m×0.25mm×0.25μm；
顶空自动进样器条件：顶空平衡温度：60～110℃；顶空平衡时间：10～30min；进样环温度：100～120℃；进样时间：1min；传输线温度110～130℃；
进样口温度：200～250℃；
柱温：起始温度为30～50℃，维持时间5～10min，以10～20℃/min速率升至100～150℃，保持2～5分钟；
检测器：FID、ECD、NPD或FPD检测器；检测器温度：250℃；
进样模式：分流进样，分流比为5～20:1；
载气：高纯惰性气体，流速1～5mL/min；
氢气流量：40～60mL/min；
空气流量：450mL/min；
尾吹流量：30mL/min。
进一步地，步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)中所用溶剂为N N二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、N 甲基吡咯烷酮中的任意一种。
进一步地，步骤(4)中所述分析条件为：色谱柱：交联色谱柱，5％苯基 95％二甲基聚硅氧烷；顶空平衡温度60℃；顶空平衡时间：30分钟；进样环温度：110℃；传输线温度：120℃；进样口温度：200℃；柱温：起始温度30℃，维持10min，以20℃/min速率升至100℃，保持2分钟；检测器：FID检测器；分流比为10:1；载气为高纯氮气，流速1mL/min；氢气流量：45mL/min。
采用上述技术方案，本发明的有益效果为：
(1)本发明提供了一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，可同时快速地检测甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷6种有机溶剂的残留量。
(2)本发明检测方法准确、操作简便、重现性好、灵敏度高，可以充分满足工业大麻提取物中有机溶剂残留量的测定要求，能更好的控制产品质量、保证产品安全。
附图说明
图1为实施例中6种有机溶剂混合对照品溶液的气相色谱图。
图1
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
本实施例所述的一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，所用仪器为PerkinElmer Clarus 690气相色谱仪，顶空进样器为PerkinElmer TurboMatrix 40；所用试剂均为色谱纯。具体步骤如下：
(1)供试品溶液的配制
称取0.1g样品置于顶空瓶中，精确至0.0001g，加入5mLN N二甲基甲酰胺，加盖密封，摇匀，得到样品溶液；
(2)空白溶液的制备
精密量取5mLN N二甲基甲酰胺，置于20mL顶空瓶中，密封，即得；
(3)对照品溶液的制备
分别精密量取甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯和正庚烷各1mL，置100mL量瓶中，N N二甲基甲酰胺定容至刻度，摇匀，配制成10mg/mL的六种混合对照品储备液， 20℃密封避光保存；
标准工作溶液：分别精密量取六种混合对照品贮备液0.125mL、0.25mL、0.5mL、1mL、2mL至50mL容量瓶中，用N N二甲基甲酰胺定容至刻度，摇匀，即得到浓度分别为25、50、100、200、400μg·mL 1的系列标准工作溶液，现用现配；
(4)设置分析条件
色谱柱：交联色谱柱，5％苯基 95％二甲基聚硅氧烷,规格：30m×0.25mm×0.25μm；
顶空自动进样器条件：顶空平衡温度：60℃；顶空平衡时间：30min；
进样环温度：110℃；进样时间：1min；传输线温度120℃；进样口温度：200℃；
柱温：起始温度为30℃，维持时间10min，以20℃/min速率升至100℃，保持2分钟；
检测器：FID检测器；检测器温度：250℃；
进样模式：分流进样，分流比为10:1；
载气：氮气，流速1/min；
氢气流量：45mL/min；
空气流量：450mL/min；
尾吹流量：30mL/min。
(5)样品测定
①系统适用性试验
精密量取空白溶剂(N N二甲基甲酰胺)，甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、正庚烷的峰定位溶液及混合对照品溶液各5ml，顶空进样。结果显示，空白溶剂不会对有机溶剂残留造成干扰，各组分均得到完全分离，分离度(R)＞1.5,各组分保留时间及分离度见表1，原始气相图谱见图1。
表1 各组分保留时间及分离度测定结果
②精密度试验
取混合对照品溶液顶空连续进样6次，RSD均在3％以内，见表2。
表2 精密度试验测定结果(n＝6)
③线性试验
分别精密量取六种溶剂混合对照品储备液0.125mL、0.25mL、0.5mL、1mL、2mL至50mL容量瓶中，用N N二甲基甲酰胺定容至刻度，摇匀，即得到浓度分别为25、50、100、200、400μg·mL 1的系列标准工作溶液，顶空进样，以对照峰面积为纵坐标，以甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、正庚烷对照品溶液浓度为横坐标，进行线性回归，测定结果见表3。
表3 线性试验测定结果
④回收率试验
精密称取工业大麻加工提取物0.1g共9份，分别置于10ml量瓶中，以此加入5ml的甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、正庚烷混合对照品溶液，加入N N二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为回收率样品溶液，各取5ml顶空进样，记录色谱图，计算回收率。经测定结果计算回收率在95％～102％之间(100％±5％)，结果见表4。
表4 回收率试验测定结果
⑤检出限及定量限
以信噪比S/N＝3计算检出限，以信噪比S/N＝10计算定量限，以此分别稀释甲醇、乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、正庚烷混合对照品储备液，取5ml顶空进样，记录色谱图，检出限及定量限测定结果见表5。
表5 各组分检出限及定量限测定结果
⑥样品检测
将步骤(1)、(3)中制备的样品溶液及对照品溶液进样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含甲醇不得超过0.1％，乙醇不得超过0.1％，二氯甲烷不得超过0.1％，正己烷不得超过0.1％，乙酸乙酯不得超过0.2％，正庚烷不得超过0.2％。
按上述方法检测样品中的有机溶剂残留，检测结果见表6。
表6 样品中各组分检测结果
尽管上文中已经用具体实施方式及实验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
文章摘自国家发明专利，一种采用顶空气相色谱检测工业大麻提取物中多种溶剂残留的方法，发明人:王钲霖，刘胜贵，李志雄，孔令羽，薛红芬，孙美玲，申请号:202510779637.3，申请日:2025.06.11。
