摘 要：本发明提供了一种含剑麻提取物的杀菌组合物及其应用，有效成分由叶菌唑/咪鲜胺和剑麻提取物组成；其中，叶菌唑与剑麻提取物的质量比为15-30:1，咪鲜胺与剑麻提取物的质量比为25-35:1，剑麻提取物为剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位；同时还提供了含剑麻提取物的杀菌组合物在防治植物炭疽病中的应用。本发明通过将剑麻提取物与叶菌唑或咪鲜胺复配，能提高叶菌唑或咪鲜胺对炭疽病的防治效果，同时还能起到延缓抗药性的作用。
权利要求书
1.一种含剑麻提取物的杀菌组合物，其特征在于：
有效成分由叶菌唑/咪鲜胺和剑麻提取物组成；其中，叶菌唑与剑麻提取物的质量比为15-30:1，咪鲜胺与剑麻提取物的质量比为25-35:1，剑麻提取物为剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位。
2.根据权利要求1所述的含剑麻提取物的杀菌组合物，其特征在于：
叶菌唑与剑麻提取物的质量比为25:1。
3.根据权利要求1所述的含剑麻提取物的杀菌组合物，其特征在于：
咪鲜胺与剑麻提取物的质量比为30:1。
4.根据权利要求1所述的含剑麻提取物的杀菌组合物，其特征在于：
所述剑麻提取物的制备方法包括以下步骤：
（1）取剑麻叶片，切碎，干燥，粉碎，加入10-20倍重量的甲醇，常温浸提36-48h，分离出浸提液，重复上述甲醇浸提步骤1-3次，合并浸提液，减压浓缩得甲醇浸膏；
（2）取甲醇浸膏，先用适量的超纯水溶解，再用乙酸乙酯进行萃取，萃取完成后取乙酸乙酯相，减压浓缩回收乙酸乙酯，剩余膏状物为剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位，即所述剑麻提取物。
5.权利要求1-4任一项所述的含剑麻提取物的杀菌组合物在防治植物炭疽病中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：
所述植物炭疽病为葡萄炭疽病或香蕉炭疽病。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：
所述含剑麻提取物的杀菌组合物还包括农药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：
所述含剑麻提取物的杀菌组合物和辅料混合制备成农药学上可接受的剂型。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：
所述剂型为可湿性粉剂、悬浮剂、乳油、水乳剂、微乳剂或水分散粒剂。
技术领域
本发明涉及剑麻深加工技术领域，尤其是一种含剑麻提取物的杀菌组合物及其应用。
背景技术
剑麻，属天门冬科龙舌兰属，为热带经济作物，因剑麻纤维的卓越性能而广泛推广种植，其纤维不仅韧性极强，更能耐海水腐蚀，目前为当今世界用量最大、范围最广的硬质纤维。随着剑麻产业开发的深入，剑麻的用途也在不断拓展，如麻渣制成饲料、肥料，提取药用成分，作为生产酒精、醋的原料等，据相关报道，剑麻的提取物也具有一定的杀菌作用。
炭疽病是一种由炭疽菌引起的植物真菌病害，广泛影响多种农作物和经济作物，如香蕉、芒果、葡萄、辣椒等作物。该病害主要通过分生孢子传播，侵染植物的叶片、果实和茎秆，导致病斑、腐烂甚至植株死亡。目前炭疽病的防控方法多是采用农药杀菌剂，然而化学类的农药杀菌剂长期使用，容易出现病原真菌对化学类农药杀菌剂的抗药性不断增大的问题，且或多或少对环境造成一定的影响。若能在炭疽病防控领域引入合适的天然提取物杀菌剂，那么将有利于延缓病原真菌对单一或复配化学农药杀菌剂的抗药性，同时也有利于环境的保护。
目前，尚未有剑麻提取物与化学农药杀菌剂复配使用防控炭疽病的相关报道。
发明内容
本发明提供了一种含剑麻提取物的杀菌组合物及其应用，通过剑麻提取物与叶菌唑或咪鲜胺复配，能提高叶菌唑或咪鲜胺对炭疽病的防治效果，同时还能起到延缓抗药性的作用。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
本发明一方面提供了一种含剑麻提取物的杀菌组合物，有效成分由叶菌唑/咪鲜胺和剑麻提取物组成；其中，叶菌唑与剑麻提取物的质量比为15-30:1，咪鲜胺与剑麻提取物的质量比为25-35:1，剑麻提取物为剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位。
优选地，叶菌唑与剑麻提取物的质量比为25:1。
优选地，咪鲜胺与剑麻提取物的质量比为30:1。
优选地，所述剑麻提取物的制备方法包括以下步骤：
（1）取剑麻叶片，切碎，干燥，粉碎，加入10-20倍重量的甲醇，常温浸提36-48h，分离出浸提液，重复上述甲醇浸提步骤1-3次，合并浸提液，减压浓缩得甲醇浸膏；
（2）取甲醇浸膏，先用适量的超纯水溶解，再用乙酸乙酯进行萃取，萃取完成后取乙酸乙酯相，减压浓缩回收乙酸乙酯，剩余膏状物为剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位，即所述剑麻提取物。
本发明另一方面还提供了以上所述的含剑麻提取物的杀菌组合物在防治植物炭疽病中的应用。
优选地，所述植物炭疽病为葡萄炭疽病或香蕉炭疽病。
优选地，所述含剑麻提取物的杀菌组合物还包括农药学上可接受的辅料。
优选地，所述含剑麻提取物的杀菌组合物和辅料混合制备成农药学上可接受的剂型。
优选地，所述剂型为可湿性粉剂、悬浮剂、乳油、水乳剂、微乳剂或水分散粒剂。
以上所述的含剑麻提取物的杀菌组合物，采用叶菌唑/咪鲜胺与剑麻提取物复配，通过室内试验结果说明，该杀菌组合物对胶孢炭疽菌和香蕉炭疽菌菌丝生长的抑制效果均表现出增效作用，可为炭疽菌的防控提供更多的复配药剂组合，可一定程度上延缓单一药剂的使用存在的抗药性问题，为杀菌剂的开发提供更广阔的思路。
另外，剑麻提取物为天然植物提取物，将其应用在作物的炭疽菌防控领域，对环境更为友好，还有利于延伸剑麻的深加工领域，提升剑麻产品的附加值。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1 剑麻提取物的筛选
1.1 材料
供试菌株：香蕉炭疽菌，采自受香蕉炭疽病侵染的香蕉果实，经分离纯化得到。
胶孢炭疽菌，采自受葡萄炭疽病侵染的葡萄果实，经分离纯化得到。
供试材料：剑麻，广西76416。
1.2 剑麻提取物的制备方法
（1）取剑麻健康植株叶片，清洗干净，剪成3cm×3cm左右的碎片，置于恒温干燥箱中控温105℃杀青1h，然后调整温度至75℃烘干至恒重，粉碎，得剑麻叶片干粉，加入10倍重量的甲醇，常温下浸提48h，分离出浸提液，重复上述甲醇浸提步骤3次，合并浸提液，减压浓缩得甲醇浸膏。
（2）取甲醇浸膏，先用适量的超纯水溶解，再分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，分离出对应的石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相，减压浓缩回收对应的有机溶剂或水，剩余膏状物分别为剑麻甲醇提取物的石油醚部位、剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位、剑麻甲醇提取物的正丁醇部位。
1.3 剑麻提取物的筛选方法
1.3.1 剑麻提取物的初步筛选
各剑麻提取物（剑麻甲醇提取物、剑麻甲醇提取物的石油醚部位、剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位、剑麻甲醇提取物的正丁醇部位）对炭疽菌菌丝生长抑制活性测定采用生长速率法，测定各剑麻提取物对供试炭疽菌病原真菌的抑菌活性。
称取2g的各剑麻提取物分别溶解于丙酮中，然后在超净工作台中各取400μL溶解后各剑麻提取物分别溶于199.6mL已冷却至50℃的PDA培养基中，配置各剑麻提取物终浓度为1mg/mL的带药培养基，倒入直径9cm的培养皿中冷却凝固，以仅加入等量丙酮的PDA培养基作为空白对照。
取在PDA培养基上预先培养好的病原菌，在菌落边缘用直径5mm的打孔器切取生长一致的菌饼，分别移植到盛放有带药培养基或空白对照的培养皿中心，每个处理重复三次，26℃倒置培养。待菌落长至培养皿直径2/3后，用十字交叉法测量并记录菌落直径，并用以下公式计算抑菌率：
基于上述抑菌率计算公式，筛选出对两种供试炭疽菌病原菌抑菌率能达到70％以上的剑麻提取物进行二次筛选。
1.3.2 剑麻提取物的二次筛选
取上述通过初步筛选的各剑麻提取物，基于上述抑菌率的公式，测定各剑麻提取物对供试炭疽菌病原菌的EC50。
将通过初筛的各剑麻提取物用一定量丙酮溶解，用0.1％吐温-80水溶液稀释成5个质量浓度梯度的母液，加入已冷却至50℃的PDA培养基中，配成5种质量浓度的带药培养基，接种方法同1.3.1，用SPSS统计软件求出毒力回归方程、有效中浓度EC50。
1.4 剑麻提取物的筛选结果
1.4.1 剑麻提取物的初步筛选结果
1mg/mL的各剑麻提取物抑菌率结果如表1所示：
表1 各剑麻提取物对2种炭疽菌的抑菌活性
选择剑麻甲醇提取物的石油醚部位和剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位进行二次筛选。
1.4.2 剑麻甲醇提取物的石油醚部位和剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位EC50的测定结果
表2 剑麻提取物的对炭疽菌的EC50
如表2所示，结合二次筛选的结果可见，剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位对香蕉炭疽菌、胶孢炭疽菌的EC50均低于剑麻甲醇提取物的石油醚部位。
实施例2 含剑麻提取物的杀菌组合物的筛选
2.1 材料
供试菌株：香蕉炭疽菌，采自受香蕉炭疽病侵染的香蕉果实，经分离纯化得到。
胶孢炭疽菌，采自受葡萄炭疽病侵染的葡萄果实，经分离纯化得到。
供试药剂：实施例1制备的剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位、96%叶菌唑原药、95%咪鲜胺原药。
2.2 试验方法
试验方法参照实施例1的试验方法，计算出EC50值，按照孙云沛法计算共毒系数(CTC)，评价药剂的增效作用。
实际毒力指数(ATI)＝(标准药剂EC50÷供试药剂EC50)×100；
理论毒力指数(TTI)＝A药剂毒力指数×混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数×混剂中B的百分含量；
共毒系数(CTC)＝[混剂实测毒力指数(ATI)÷混剂理论毒力指数(TTI)]×100。
按照联合作用划分标准：共毒系数(CTC)≥120表现为增效作用；共毒系数(CTC)≤80表现为拮抗作用；80<共毒系(CTC)<120表现为相加作用。
表3为叶菌唑与剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位对胶孢炭疽菌的毒力试验测试结果。
表3 叶菌唑与剑麻提取物对胶孢炭疽菌的毒力试验结果
从表3可以看出，叶菌唑和剑麻提取物复配后，在重量比为15:1-30:1的范围内，对胶孢炭疽菌的共毒系数均大于120，表现为增效作用。
表4为咪鲜胺与剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位对胶孢炭疽菌的毒力试验测试结果。
表4 咪鲜胺与剑麻提取物对胶孢炭疽菌的毒力试验结果
从表4可以看出，咪鲜胺和剑麻提取物复配后，在重量比为30:1-35:1的范围内，对胶孢炭疽菌的共毒系数均大于120，表现为增效作用。
表5为咪鲜胺与剑麻甲醇提取物的乙酸乙酯部位对香蕉炭疽菌的毒力试验测试结果。
表5 咪鲜胺与剑麻提取物对香蕉炭疽菌的毒力试验结果
从表5可以看出，咪鲜胺和剑麻提取物复配后，在重量比为25:1-35:1的范围内，对香蕉炭疽菌的共毒系数均大于120，表现为增效作用。
综上所述，本实施例提供的含剑麻提取物的杀菌组合物，通过室内试验结果说明，其对胶孢炭疽菌和香蕉炭疽菌菌丝生长的抑制效果均表现出增效作用，可为炭疽菌的防控提供更多的复配药剂组合，可一定程度上延缓单一药剂的使用存在的抗药性问题，为杀菌剂的开发提供更广阔的思路。
文章摘自国家发明专利，一种含剑麻提取物的杀菌组合物及其应用，发明人:覃旭，陈涛，金刚等，申请号:202511642491.4，申请日:2025.11.11。
