摘  要：目的： 研究罗布麻茶改善睡眠功效。方法： 通过小鼠经口连续灌胃给予高剂量、中剂量和低剂量 3 种不同剂量的罗布麻茶 30 d，然后对给药后小鼠的戊巴比妥钠直接睡眠的实验、戊巴比妥钠阈下剂量的催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验对罗布麻茶功效进行评价。结果： 与阴性对照组比较，戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间罗布麻茶高剂量组显著延长( P ＜ 0. 01) ，睡眠潜伏期明显减短( P ＜ 0. 01) ； 罗布麻茶中剂量组小鼠睡眠时间延长( P ＜ 0. 05) ； 直接睡眠实验入睡动物个数、睡眠时间及戊巴比妥钠入睡发生率罗布麻茶高剂量组、罗布麻茶中剂量组、罗布麻茶低剂量组与阴性对照组比较差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) ； 各项实验小鼠体质量罗布麻茶高剂量组、罗布麻茶中剂量组、罗布麻茶低剂量组与阴性对照组比差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。结论： 罗布麻茶具有改善睡眠的功效。

关键词：罗布麻茶； 小鼠； 戊巴比妥钠； 巴比妥钠； 催眠实验； 潜伏期； 功效评价； 改善睡眠

罗布麻( Apocynum venetum L. ) 属夹竹桃科植物，《中华人民共和国药典》记载，用鲜叶加工成的罗布麻茶功能主治“平肝安神、清热利水、高血压、神经衰弱”等［1-2］。近几年，具有保健功效的纯天然产品受到亚健康人群的青睐，罗布麻作为天然草本药物，随着人们对其研究的日益深入，其保健功效也逐渐被人们所接受。罗布麻叶中含黄酮、有机酸、鞣质、脂肪酸醇酯、氨基酸、矿物元素及其他物质［3-5］。国内外研究发现，罗布麻叶中的有效成分具有降血压、降血脂、抗氧化、防抑郁、利尿、保护肾脏和保护心血管等作用［6-7］。目前国内外对罗布麻茶中有效物质改善睡眠功能的研究尚未见报道。

本研究所用罗布麻生长在东经 87°33'； 北纬 47°42'的新疆阿勒泰阿拉哈克乡东戈壁。本实验以小鼠为观察对象，观察罗布麻茶改善睡眠的功效，为产品的进一步开发提供科学依据。

1材料与方法

1.1材料

1. 1. 1 动物

选用新疆医科大学实验动物中心提供的美国癌症研究所( Institute of Cancer Research，ICR) 雄 性 小 鼠 192 只［实 验 动 物 生 产 许 可 证 号：SCXK( 新) 2018-0002，实验动物使用许可证 SYXK( 新) 2018-0001］，5 ～ 6 周 龄，饲 养 室 温 度( 23 ± 3 ) ℃、湿 度 40% ～ 70% 、噪 声 ＜ 85 dB，12 h /12 h白天和黑夜循环照明，本实验方案交由实验动物管理( 伦理) 委员会审查、批准后实施完全按国家相关实验动物福利法规规定执行( 伦理审批号：nGLP-2019015) 。

1. 1. 2 药物

罗布麻茶，袋泡茶，内容物为由罗布麻叶、五味子提取物、酸枣仁提取物组成的颗粒状物质，由阿勒泰戈宝茶股份有限公司生产提供，批号：20181116。推荐成人日摄入定型产品量 9 g /60 kg( 开水泡服，2 次/d，1 袋/次，4. 5 g /袋) ，以厂家提供的浓缩液( 褐色膏状，1 g 定型产品相当于 0. 7 g 浓缩液) 作为受试物，则浓缩液的日摄入量为 6. 3 g /60 kgBW，即 0. 105 g /kgBW。

1. 1. 3 试剂与仪器 

戊巴比妥钠( 北京化学试剂公司，批号： AM00469) 、巴比妥钠( 成都康弘药业集团股份有限公司，批号： 190305) ，2 种试剂均现配现用。电子天平( 德国赛多利斯股份公司，型号： BT-124S) 、电热蒸馏水器( 北京市永光明医疗仪器厂，型号： HS. Z68. 10) 、超声波加湿器( 北京亚都室内环保科技股份有限公司，型号： YC-D209) 。

1. 2 方法

1. 2. 1 分组与模型制备 

分别选取 48 只体质量为18. 7 ～ 21. 5 g 的小鼠并分为 4 组，每组 12 只，进行直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠催眠潜伏期实验［8］。

1. 2. 2 给药方法 

以成人( 体质量按 60 kg 计) 每天摄入浓缩液的量( 0. 105 g /kg) 的 10、20 和 30 倍设置剂量组，则罗布麻茶高剂量组、罗布麻茶中剂量组、罗布麻茶低剂量组的剂量分别为 3. 15 g /kg、2. 10 g /kg、1. 05 g /kg。精 确 称 取 7. 88 g、5. 25 g、2. 63 g 浓缩液于 50 mL 容量中，加入蒸馏水，充分溶解后定容，阴性对照组为蒸馏水，每组 12 只。各剂量组小 鼠 每 天 灌 胃 给 予 浓 缩 液 1 次，灌 胃 量 为0. 2 mL /10 g，阴性对照组小鼠给予等体积的蒸馏水，各剂量组持续灌胃 30 d。小鼠于末次给药前 1 d给予蒸馏水及不同浓度浓缩液 60 min 后，检测各组小鼠自主活动 5 min 自主活动行为情况，动物须在检测开始前 2 min 放入旷场箱内适应后开始测试。

1. 2. 3 检测指标与方法

1. 2. 3. 1 直接睡眠实验 

小鼠末次喂予蒸馏水及不同浓度样品的受试物后，查看受试样品组及阴性对照组有无入睡表现，以翻正反射消失为标准，记录阴性对照组与受试样品组入睡小鼠个数及入睡时间。

1. 2. 3. 2 延长戊巴比妥钠睡眠时间实验 

正式实验开始前先做预实验，找到使小鼠完全入睡，但又不会使 其 入 睡 时 间 过 长 的 戊 巴 比 妥 钠 剂 量( 45 mg /kg) ，并以此剂量开展后面实验。小鼠最后1 次给予蒸馏水及不同浓度受试物后，出现峰作用前 15 min，给各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠，注射量为 0. 1 mL /10 g，以翻正反射消失为标准，查看受试样品能否延长戊巴比妥钠睡眠时间。

1. 2. 3. 3 戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验 

正式实验开始前先做预实验，确定戊巴比妥钠最大阈下催眠剂量( 26 mg /kg) ： 85% 小鼠翻正反射不消失的戊巴比妥钠最大阈下剂量。小鼠最后 1 次给予蒸馏水及不同浓度受试样品后，出现峰作用前 10 min，各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠最大阈下催眠剂量，注射量为 0. 1 mL /10 g，记录 30 min 内入睡个体数( 翻正反射消失 60 s 以上) 。

1. 2. 3. 4 巴比妥钠睡眠潜伏期实验 

正式实验开始前先做预实验，确定小鼠完全入睡，但又不会使其入睡过长时间的巴比妥钠的剂量( 260 mg /kg) ，并以此剂量开展后面实验。

1. 3 统计学方法 

采用 SPSS 22. 0 软件进行数据处理，采用方差分析法进行均值比较，方差齐性，各组间 比 较 用 LSD 法； 方 差 不 齐 性，各 剂 量 组 间 Tamhane，s 法比较。用方差分析小鼠体质量、入睡时间、入睡动物数、潜伏期的单因素实验数据； 用 χ2检验分析入睡动物发生率的实验数据。以 P ＜ 0. 05为差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 罗布麻茶对小鼠体质量的影响

小鼠最后 1次喂予蒸馏水及不同浓度受试物后，对小鼠实验前后体质量进行方差分析，结果说明，各剂量组实验前后小鼠体质量与阴性对照组比较，差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。见表 1。小鼠最后 1 次喂予蒸馏水及不同浓度受试物后，对小鼠实验前后体质量方差分析，结果说明，各剂量组实验前与实验后小鼠体质量与阴 性 对 照 组 比 较，差异无统计学意义 ( P ＞0. 05) 。见表 2。各剂量组实验前后小鼠体质量与阴性对照组比较，差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。见表 3。小鼠最后 1 次喂予蒸馏水及不同浓度受试物后，对小鼠实验前后体质量进行方差分析，结果说明，各剂量组实验前后小鼠体质量与阴性对照组比较，差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。见表 4。

2. 2 罗布麻茶对直接睡眠实验入睡小鼠数及入睡时间的影响

与阴性对照组比较，各剂量组入睡动物只数及入睡时间均为 0，差异无统计学意义( P ＞0. 05) 。

2. 3 罗布麻茶对戊巴比妥钠入睡时间的影响 

各组的入睡时间差异有统计学意义( P ＜ 0. 05) ，与阴性对照组比较，高剂量组小鼠入睡时间显著增长( P ＜ 0. 01 ) ，中剂量组小鼠入睡时间增长 ( P ＜0. 05) ，剂量低的观察组小鼠入睡时间无明显变化( P ＜ 0. 05) 。见表 5。

2. 4 罗布麻茶对戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验入睡发生率的影响

与阴性对照组比较，各剂量组小鼠的入睡发生率差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。见表 6。

5 罗布麻茶对戊巴比妥钠潜伏期的影响

与阴性对照组比较，罗布麻茶高剂量组小鼠睡眠潜伏期明显变短，差异有统计学意义( P ＜ 0. 01) ，罗布麻茶中剂量组、罗布麻茶低剂量组小鼠睡眠潜伏期差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。见表 7。

3 讨论

目前，失眠已成为社会普遍现象，严重影响人们的正常生活。西医认为睡眠主要是因为大脑神经系统调节功能发生障碍； 中医认为是人体阴阳失衡。常见安眠药的作用机制是抑制神经系统，降低神经兴奋性。因此，它在帮助失眠患者改善睡眠的同时，会严重减低神经系统的调节功能。长期服用，易形成药物 依 赖，甚至发生慢性中毒及戒断综合征等［9-13］。罗布麻茶以平肝安神，补肾宁心为法，选用罗布麻叶，辅以酸枣仁提取物，再配以五味子提取物共同组方，改善睡眠。现代研究表明： 罗布麻叶对戊巴比妥的镇静催眠作用有协同作用； 酸枣仁具有延长大鼠慢波睡眠深睡阶段的功效； 五味子能延长睡眠时间，镇静安神，同时具有提高机体免疫力的功效。罗布麻茶作为一种天然安全的保健食品不仅可以改善睡眠还不会生产依赖性，其中含有的黄酮类等物质使其保健功效更为明确。

通过罗布麻茶小鼠实验说明，对小鼠经口连续灌胃给予高剂量、中剂量、低剂量的罗布麻茶 30 d，与阴性对照组比较，戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间高剂量组显著延长，睡眠潜伏期明显减短； 中剂量组小鼠睡眠时间延长； 直接睡眠实验入睡动物个数、睡眠时间及戊巴比妥钠入睡发生率罗布麻茶高剂量组、罗布麻茶中剂量组、罗布麻茶低剂量组与阴性对照组比较无显著性差异； 各项实验小鼠体质量罗布麻茶高剂量组、罗布麻茶中剂量组、罗布麻茶低剂量组与阴性对照组比较无显著性差异，根据《保健食品检验与评价技术规范》( 2003 版) 中的评价标准，认为罗布麻茶具有改善睡眠的功效［14-21］。经过实验比较，罗布麻茶可使小鼠的体质量有一定程度的降低，罗布麻具有清热利尿及增加肠蠕动的作用，进而促进新陈代谢，降低体质量，引起动物脑系数的升高，即小鼠脑组织中枢神经递质 5-羟色胺、多巴胺的水平，罗布麻改善睡眠的机制可能在于促进 5-羟色胺的生物合成过程，从而帮助患者改善睡眠^［22］。

参考文献

［1］国家药典委员会． 中华人民共和国药典( 一部) ［M］． 北京： 中国医药科技出版社，2015： 1064-1065．

［2］杨利，韩诗雯，车会莲，等． 罗布麻茶水提物对自发性高血压大鼠血压的调节作用［J］． 中国食品学报，2017，17( 7) ： 55-60．

［3］杨利，韩诗雯，车会莲，等． 罗布麻茶和罗布麻叶对 SHR 生理影响的比较研究［J］． 食品科技，2015，40( 10) ： 181-185．

［4］李庆华，魏春雁，李建东． 罗布麻叶药理作用及临床应用研究进展［J］． 中药材，2008，31( 5) ： 784-787．

［5］虞颖映． 罗布麻茶对心血管系统的生物学效应及其安全性评价［D］． 杭州： 浙江大学，2006．

［6］Kim D，Yokozawa T，Hattori M，et al． Effects of aqueous extracts of Apocynum venetum leaves on spontaneously hypertensive，renal hypertensive and NaCl-fed-hypertensive rats［J］． J Ethnopharmacol，2000，72( 1-2) ： 53-59．

［7］谭晓蕾，彭勇． 罗布麻茶的研究进展［J］． 中国现代中药，2014，16( 8) ： 666-673，680．

［8］国家食品药品监督管理局． 保健食品检验与评价技术规范［S］．北京： 中华人民共和国卫生部，2003： 81-83．

［9］Kagawa T，Nakazawa Y，Tagashira E，et al． Studies on antihypertensiveeffect of luobuma( Apocynum venetum L． ) leaf extract( ［J］． Natural Medicines，2004，58( 3) ： 109-112．

［10］赵爱，高明菊，曾鸿超，等． 三七叶苷软胶囊改善睡眠功能实验研究［J］． 现代中药研究与实践，2012，26( 2) ： 34-36．

［11］黄云祥，彭友舜，王曼，等． 速溶芦笋粉改善小鼠睡眠的研究［J］． 中国实验方剂学杂志，2012，18( 23) ： 280-282．

［12］赵倩倩，张少军，万闽歌，等． 五味子茎叶的化学成分研究［J］．中草药，2021，52( 23) ： 7111-7116．

［13］兰继平，张洁玉，童仁超，等． 车前子对原发性高血压大鼠的降压作用［J］． 中成药，2020，42( 8) ： 2037-2042．

［14］朱雪峰，李世芬，胡奇，等． 夜来香片改善睡眠功能研究［J］． 现代食品，2019，5( 17) ： 153-156．

［15］张久旭，刘洋，顾文宏，等． 辣木叶复方改善小鼠睡眠功能的实验研究［J］． 中医药学报，2018，46( 6) ： 39-43．

［16］肖玉焕，韩丽，李浩然，等． 灵芝多糖防治中枢神经系统疾病的研究进展［J］． 中草药，2020，51( 24) ： 6391-6395．

［17］马淑凤，王芳，李汉臣，等． 速溶芦笋粉改善睡眠功能的研究［J］． 食品工业科技，2012，33( 18) ： 359-362．

［18］郭瑜，何伟，罗福祥，等． 罗布红麻提取物单次给药及 20 天亚急性毒性实验研究［J］． 新疆医学，2019，49( 8) ： 770-773．

［19］刘莹，管彤，梁昊都，等． 酸枣仁改善睡眠药理作用及其机制研究［J］． 中医药信息，2021，38( 3) ： 82-86．

［20］孙守弼，周博宇，隋自洁，等． 五味子、刺五加、酸枣仁改善睡眠功能的研究综述［J］． 医学食疗与健康，2021，19( 5) ： 196-198．

［21］邵莉，王锦，陈蔓芸，等． 东北刺人参根部的酚苷成分［J］． 中草药，2017，48( 22) ： 4620-4625．

［22］何伟，王莉，黄景凤，等． 罗布麻叶水提物镇静催眠作用研究［J］． 药物评价研究，2022，45( 2) ： 274-280．

文章摘自：何伟，王莉，刘磊，黄景凤，李治建.罗布麻茶改善睡眠功能实验研究[J].世界中医药，2022，17(23)：3356-3359.