作者：韩鑫垚等   来源：   发布时间：2022-09-05   Tag:   点击：
[麻进展]汉麻提取物延缓皮肤衰老作用研究韩鑫垚
摘  要：考察不同汉麻提取物，即CBD（大麻二酚）晶体、CBD广谱油和86.69%CBD油在皮肤衰老过程对透明质酸酶、胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的抑制作用，实现天然植物对皮肤抗衰老活性的初步探究。实验中以EGCG（茶多酚）作为阳性对照，使用酶标仪测定样品的吸光度，利用公式计算不同汉麻提取物对酶的抑制率。结果表明，与EGCG阳性曲线对照相比，发现汉麻提取物对透明质酸酶、胶原蛋白酶和弹性蛋白酶抑制作用明显，具有良好的皮肤抗衰老功效。其中86.69%CBD油对透明质酸酶的抑制效果较好，CBD广谱油对胶原蛋白酶的抑制效果明显，CBD晶体和CBD广谱油对弹性蛋白酶抑制作用显著，以上结果为汉麻提取物在医药和化妆品行业的产品研究提供了一定的数据参考和科学依据。
关键词：汉麻提取物；透明质酸酶；胶原蛋白酶；弹性蛋白酶；皮肤抗衰老；
 
引言
研究不同汉麻提取物的皮肤抗衰老活性，通过测定CBD晶体、CBD广谱油和86.69%CBD油对透明质酸酶、胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的抑制率，从而分析其在抗衰老过程的作用。
1实验
1.1试剂与仪器
试剂：甲醇（天津大茂化学试剂厂）；磷酸二氢钠（天津大茂化学试剂厂）；磷酸氢二钠（天津大茂化学试剂厂）；弹性蛋白酶（美国Sigma公司）；胶原蛋白酶（美国Sigma公司）；N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰）-亮氨酰-甘氨酰-脯氨酰-丙氨酸（FALGPA，美国Sigma公司）；牛血清白蛋白（美国Sigma公司）；茶多酚（EGCG，美国Sigma公司）；N-琥珀酰基-三-丙氨酸-对硝基苯胺（SANA，美国Sigma公司）；透明质酸酶（美国Sigma公司）；透明质酸（美国Sigma公司）；CBD晶体（中升生物科技有限公司）；CBD广谱油（中升生物科技有限公司）；86.26%CBD油；Tris-HCl缓冲盐（上海阿拉丁生物科技有限公司）。
仪器：FC型酶标仪（赛默飞世尔仪器有限公司）；超声清洗仪（上海豫明仪器有限公司）；79-1磁力加热搅拌器（山东邺城华鲁电热仪器有限公司）；电热鼓风干燥箱（南京仪器厂）。
1.2汉麻提取物抑制透明质酸酶实验
在96孔板中，依次加入样品溶液与透明质酸酶溶液，磷酸缓冲液，透明质酸钠溶液，震荡混匀，在37℃孵育45min，加入酸性白蛋白溶液。用酶标仪测定其在600nm处的吸光度。以EGCG为阳性对照，每个样品重复三次。
1.3汉麻提取物抑制胶原蛋白酶实验
在96孔板中，依次加入样品溶液与胶原蛋白酶溶液，Tris-HCl缓冲液，震荡混匀，在37℃孵育15min，加入FALGPA溶液。用酶标仪测定其在345nm处的吸光度。以EGCG为阳性对照，每个样品重复三次。
1.4汉麻提取物抑制弹性蛋白酶实验
在96孔板中，依次加入样品溶液与弹性蛋白酶溶液，Tris-HCl缓冲液，震荡混匀，在37℃孵育15min；加入SANA溶液，在37°C恒温箱中孵育20min后，用酶标仪测定其在410nm处的吸光度。以EGCG为阳性对照，每个样品重复三次。
抑制率按下列公式计算：
抑制率（%）=（1-A空白/A样品）×100%
式中，A样品:样品溶液、透明质酸钠（FALGPA，SANA）、磷酸缓冲液、透明质酸（胶原蛋白、弹性蛋白）酶混合物的吸光度；A空白:透明质酸钠（FALGPA，SANA）溶液、磷酸缓冲液、透明质酸（胶原蛋白、弹性蛋白）酶混合物的吸光度。
2结果与讨论
2.1汉麻提取物对透明质酸酶抑制效果研究
从天然植物中提取出的多酚类化合物，如茶多酚（EGCG），已被证实具有良好的抗氧化效果，能够清除体内自由基，抑制氧化反应的发生，同时具有抗敏性，因而广泛用于化妆品中。选用EGCG作为阳性药物作为对照，评价不同汉麻提取物样品的抗衰老活性。实验结果表明，随着浓度的增大，所有样品对透明质酸酶的抑制率均增大，当浓度为1.5mg/mL时，抑制率基本不再增加。当浓度为1.5mg/mL时，茶多酚、CBD广谱油、CBD晶体、86.69%CBD油对透明质酸酶的抑制率分别为89.336%，90.309%，93.513%，94.121%。与EGCG阳性对照相比得知，CBD广谱油、CBD晶体、86.69%CBD样品对透明质酸酶的抑制率大于茶多酚，其中86.69%CBD油对酶的抑制效果最为明显，说明汉麻提取物可有效抑制透明质酸酶的活性，维持皮肤中透明质酸的水平，从而避免皮肤中水分的流失、促进营养物质与代谢废物交换的过程。
 
图1 不同汉麻提取物对透明质酸酶的抑制活性
2.2汉麻提取物对胶原蛋白酶抑制效果研究
随着浓度的增大，所有样品对胶原蛋白酶的抑制率均增大，当浓度为1.5mg/mL时，抑制率基本不再增加。当浓度为1.5mg/mL时，茶多酚、86.69%CBD，CBD晶体，CBD广谱油对胶原蛋白酶的抑制率分别为75.255%，83.481%，83.512%，84.311%。与EGCG阳性对照相比得知，CBD晶体，CBD广谱油，86.69%CBD油对胶原蛋白酶的抑制率大于茶多酚，其中CBD广谱油对酶的抑制效果最为明显，说明汉麻提取物可有效抑制胶原蛋白酶的活性，维持皮肤中胶原蛋白的水平，增强皮肤的弹性和强度，保持皮肤的柔韧性。
2.3汉麻提取物对弹性蛋白酶抑制效果研究
随着浓度的增大，所有样品对弹性蛋白酶的抑制率均增大，当浓度为1.5mg/mL时，抑制率基本不再增加。当浓度为1.5mg/mL时，茶多酚，86.69%CBD，CBD广谱油，CBD晶体对弹性蛋白酶的抑制率分别为69.231%，90.924%，95.423%，95.433%。与EGCG阳性对照相比得知，CBD晶体，CBD广谱油，86.69%CBD油对弹性蛋白酶的抑制率大于茶多酚，其中CBD晶体和CBD广谱油对酶的抑制效果均十分显著，说明汉麻提取物可有效抑制弹性蛋白酶的活性，维持皮肤中弹性蛋白的水平，使皮肤富有弹性，延缓皮肤衰老过程。
 
图2 不同汉麻提取物对胶原蛋白酶的抑制活性
 
图3 不同汉麻提取物对弹性蛋白酶的抑制活性
3结论
主要探讨了不同汉麻提取物，即CBD晶体、CBD广谱油、86.69%CBD油对透明质酸酶、胶原蛋白酶及弹性蛋白酶的抑制作用。实验结果表明汉麻提取物抗衰老效果显著，能很好地抑制透明质酸酶、胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的活性，延缓皮肤衰老过程，未来将在医疗领域和化妆品领域有广阔的应用前景。
 
参考文献
[1]Turnheim Klaus.When drug therapy gets old:pharmacokinetics and pharmacodynamics in theelderly[J].Experimental gerontology，2003，38（8）:843-853.
[2]Kirkwood T B.Understanding the odd science of aging[J].Cell，2005，4，437-447.
[3]Nattaya L，Mayuree K，Puxvadee C，et al.In vitro and cellular activities of the selected fruits residues for skin aging treatment[J].Annals of the Brazilian Academy ofSciences，2017，89:577-589.
[4]Rivera D，Rommi K，Fernandes M M，et al.Biocompounds from rapeseed oil industry co-stream as active ingredients for skin care applications[J].International Journal of Cosmetic Science，2015，37（5）:496-505.
[5]Ramachandran C，K-W.Quirin，Resek A，et al.Protective and restorative effects of a Commiphora mukul gum resin and triheptanoin preparation on the CCL-110 skin fibroblast cell line[J].International Journal of Cosmetic Science，2012，34:155-160.
[6]杨柳秀，李超然，高雯.大麻化学成分及其种属差异研究进展[J].中国中药杂志，2020，45（15）:3558-3564.
[7]傅强，舒智，邓轲.反相HPLC法测定大麻植物中的三种有效成分[J].法医学杂志，2016，32（4）:261-264.
[8]陈璇，杨明，郭鸿彦.大麻植物中大麻素成分研究进展[J].植物学报，2011，46（2）:197-205.
[9]魏梦雅，宋阳，吴华，等.大麻提取物在化妆品及相关领域的应用研究进展[J].日用化学品科学，2020，43（11）:16-18.
 
文章摘自：韩鑫垚，王金鑫，张欣梦，闫森博，王磊，陈雨欣，袁敏.汉麻提取物延缓皮肤衰老作用研究[J].佳木斯大学学报（自然科学版），2022，40(03):111-113.

更多阅读